彼得・帕克（托比・马奎尔饰）的侠客生活正值春风得意，梦中女孩玛丽・珍心甘情愿地投入了他的怀抱，纽约城尊他为“蜘蛛英雄”，蜘蛛侠3《号角日报》的记者工作没了障碍。然而，平静的背后总隐藏着惊人的暴风雨。好友哈里已然察觉出帕克便是杀死父亲的凶手，在密室里发现“绿魔”装备的他，一番痛苦挣扎后，决定继承父亲衣钵变身“二代绿魔”，要蜘蛛侠血债血偿。另外，从监狱逃脱的弗林特・马克意外变成了威力巨大的“沙人”，而此人恰恰与帕克最敬爱的本叔叔的死脱不了干系。内忧外患接踵而来，而某个夜里，一个神秘的外星生物更侵入了蜘蛛侠的战衣。原本红蓝相间的正义“蜘蛛”，瞬间化作黑色的邪恶，帕克的力量更加强大，然而他的思想也开始受到侵袭。无独有偶，对史黛茜心存爱慕的报社记者得到了黑色蜘蛛服，对蜘蛛侠又恨又嫉的他，就此化身邪恶的“毒液”！蜘蛛侠最终做出决定，对抗黑暗力量。（CCTV-6电影2010-02-20）